Содержание антигена р24 ВИЧ 1 коррелирует с интенсивностью репликации вируса и, как правило, выявляется в крови уже через 2 недели после заражения, опережая появление антител к белкам ВИЧ на 1-2 недели. Тест на р24 рекомендуется использовать как менее дорогостоящую альтернативу молекулярно-генетических исследований при ранней диагностике инфекции у новорожденных, у лиц в раннем периоде после рискованного контакта с биологическим материалом, содержавшим вирус, а также в комплексе мероприятий, обеспечивающих безопасность донорских тканей и органов (1,2).Тестирование на р24 антиген ВИЧ сывороток лиц с высоким риском заражения осуществляются в лаборатории красноярского Центра СПИД с 2000г (3). Вместе с тем, введение с 2006 г в алгоритм скрининговой диагностики ВИЧ-инфекции тест-систем для одновременного выявления специфических антител и р24 антигена ВИЧ предполагает широкое использование тестов на антиген р24 в арбитражной диагностике в случаях позитивных результатов первичного ИФА и последующего получения отрицательного или неопределенного результата в реакции иммунного блота (ИБ). Чувствительность используемого теста во всех этих случаях имеет решающее значение, поскольку на самых ранних стадиях развития инфекции концентрация р24 в сыворотке очень мала. В связи с этим достаточно большой интерес вызвала разработка НПО “Диагностические системы” (г. Нижний Новгород) более чувствительной тест-системы “ДС-ИФА-ВИЧ-АГ-СКРИН”. Целью настоящего исследования явилась сравнительная оценка диагностической эффективности тест-систем для выявления антигена р24 ВИЧ-1 с чувствительностью 5 и 0,5 пг/мл.

Материалы и методы

Исследования проводились на базе КГУЗ “Красноярский краевой центр СПИД” в период с 10.02.07-19.03.07. В работе использовались тест-системы “ДС-ИФА-ВИЧ-АГ-СКРИН” и “ДС-ИФА-ВИЧ-АГ”, заявленная производителем чувствительность составляет 0,5 и 5 пг/мл соответственно.

В работе исследовались следующие категории сывороток:

- Сыворотки, исследованные методом иммунного блоттинга при проведении арбитражных исследований (положительные, неопределенные и отрицательные).

- Сыворотки от диспансерных ВИЧ-инфицированных пациентов, проходящих плановое обследование (входят в группу сывороток, положительных в реакции ИБ).

Достоверность полученных данных определялась с использованием непараметрического критерия χ2, в программе Statistica 6,0.

Результаты и обсуждение

Результаты, полученные в группе сывороток, позитивных в ИБ, приведены в таблице 1. Из таблицы хорошо видно, что процент выявления при использовании более чувствительной тест-системы составляет 3,4%. С достоверностью значимых отличий на уровне тенденции ( ≤0,1). Очевидно, у лиц с высоким титром специфических антител к антигену р24 в иммуносохранной стадии заболевания практически все антигены связаны в иммунные комплексы и не определяются используемыми тест-системами.

Данные, полученные при исследовании группы сывороток с сомнительным иммуноблотом, приведены в таблице 2.

Можно с уверенностью сказать, что в данной группе выявляемость антигена р24 больше почти в 4 раза при применении более чувствительной тест-системы. Критерий χ2, позволяет считать этот результат достоверным при уровне значимости 0,05. Очевидно, группа лиц, положительных на тест-системе “ДС-ИФА-ВИЧ-АГ-СКРИН”, в этом случае свидетельствует о реальной инфицированности и предшествует последующему положительному иммунному блоту. Использование при этом более чувствительной тест-системы реально повышает выявляемость ранних случаев ВИЧ.

При исследовании группы положительных в ИФА, но отрицательных в реакции иммуноблота сывороток (табл. 3) достоверных отличий выявлено не было. При использовании как “ДС-ИФА-ВИЧ-АГ”, так и “ДС-ИФА-ВИЧ-АГ-СКРИН”, выявляемость антигена у этой группы пациентов приближается к 6%. Очевидно, именно такой процент первично позитивных в ИФА сывороток принадлежит лицам в стадии ранней сероконверсии, когда чувствительность иммунного блота к циркулирующим антителам еще не достаточна. Различия чувствительности используемых тест-систем не проявились, вероятно, в связи с малой выборкой и низкой вероятностью случаев одновременного включения в выборку лиц с отличающимися концентрациями антигена.

К сожалению, действующие правила диспансеризации не предусматривают дополнительного контроля пациентов с отрицательным иммунным блотом, независимо от наличия положительной реакции на антиген р24, что может приводить к пропуску реальных случаев ранней сероконверсии.

Выводы

Выявляемость антигена р24 в группе сывороток, сомнительных в ИБ при применении тест-системы “ДС-ИФА-ВИЧ-АГ-СКРИН” составляет 27,5%, а при применении теста “ДС-ИФА-ВИЧ-АГ” - 7%. Различия при выявлении антигена р24 в группах сывороток, положительных или отрицательных в ИБ в исследованных тест- системах не являются достоверными.

Использование тест-системы повышенной чувствительности “ДС-ИФА-ВИЧ-АГ-СКРИН” следует рекомендовать для выявления случаев ранней сероконверсии у лиц с первично-положительным результатами ИФА в комбинированном тесте выявления специфических антител и р24 антигена ВИЧ, но отрицательных или сомнительных в реакции иммунного блота.

Литература.

1. Каральник Б.В., Рязанова Г.Л., Шуратов И.Х. Причины ложноположительных результатов с рекомбинантными препаратами на ВИЧ-инфекцию //ЖМЭИ, 1991.-9.-32-35.

2. Лобзин Ю.В, Жданов К.В.,Пастушенков В.Л ВИЧ-инфекция, клиника, диагностика, лечение/ С.-Петербург, Фолиант, 2003 г.

3. Мартынов М.Н., Шевченко Н.М., Виноградова М.Н. Возможности использования теста на антиген ВИЧ р 24/ Бюллетень лабораторной службы , вып.9., 2001г, стр.14.

Красноярский краевой Центр СПИД, (*) НПО “Диагностические системы”