СКАЧАТЬ (9.95 Кб в архиве, формат - MS Word)

"Лабораторная диагностика" №2 2011 г.

ПРИ ПУБЛИКАЦИИ МАТЕРИАЛОВ ССЫЛКА НА ИСТОЧНИК ОБЯЗАТЕЛЬНА !!!

ПОДПИСКА НА ЖУРНАЛ

САЙТ МЕДРЕЕСТР - УДОБНЫЙ ПОИСК МЕДТЕХНИКИ И ТОРГУЮЩИХ ФИРМ


Приложение N 2

к приказу Департамента здравоохранения города Москвы

от 21 апреля 2010 г. N 365 О СОВЕРШЕНСТВОВАНИИ МЕРОПРИЯТИЙ ПО ДИАГНОСТИКЕ И ПРОФИЛАКТИКЕ САЛЬМОНЕЛЛЕЗА

ПРАВИЛА

ОТБОРА ПРОБ БИОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ДЛЯ ЛАБОРАТОРНОЙ

МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ САЛЬМОНЕЛЛЕЗА

(Основание: методические указания МУ 4.2.2723-10 “Лабораторная диагностика сальмонеллезов, обнаружение сальмонелл в пищевых продуктах и объектах окружающей среды”, МУ 4.2.2039-05 “Техника сбора и транспортирования биоматериалов в микробиологические лаборатории”)

Показания к исследованию

Исследование на сальмонеллез проводят с целью диагностики заболеваний, выявления сальмонеллоносительства, определения соответствия гигиеническим требованиям безопасности пищевых продуктов, выявления обсемененности сальмонеллой объектов внешней среды, а также при расследовании вспышек сальмонеллеза с целью установления источников и факторов передачи возбудителей инфекции.

Отбор проб, транспортировка клинического материала

Для исследования на наличие сальмонелл отбирают испражнения, рвотные массы и промывные воды желудка, кровь, мочу, а при наличии специальных показаний — желчь, дуоденальное содержимое, спинномозговую жидкость и аутопсийный материал.

Общие требования к отбору проб биологического материала для микробиологического исследования

Патологический материал следует доставлять в лабораторию в возможно короткий срок, но не позднее 12 часов после отбора, испражнения (фекалии) — не позднее 3–4 часов. Кровь высевают у постели больного.

В случае невозможности доставки в установленные сроки материал посылают в консерванте или на транспортной среде. В подобных случаях биологический материал до исследования хранят при температуре 4­­–6 °С не более 24 часов.

Для предохранения от инфицирования медицинского персонала и пациентов при отборе проб биоматериала и доставке его в лабораторию (исключения возможности контаминации их за счет смежных областей кожи, других органов, внешней среды и т.п.) необходимо:

- не контаминировать наружную поверхность посуды при сборе и доставке проб;

- не контаминировать сопроводительные документы (направления);

- свести к минимуму непосредственный контакт пробы биоматериала с руками медицинского работника, собирающего и доставляющего его в лабораторию;

- использовать стерильные одноразовые или разрешенные к применению для этих целей в установленном порядке контейнеры (емкости) для сбора, хранения и доставки проб;

- транспортировать пробы в переносках или укладках с раздельными гнездами;

- соблюдать асептические условия для предотвращения инфицирования пациента в процессе выполнения инвазивных мероприятий;

- собирать пробы в стерильную одноразовую пластиковую или стеклянную посуду (не контаминированную биоматериалом, не имеющую трещин, отколотых краев и других дефектов).

Пробы биологического материала необходимо собирать следующим образом:

- до начала антибактериальной терапии, при отсутствии такой возможности — непосредственно перед повторным введением (приемом) препаратов;

- в количестве (вес, объем), необходимом для выполнения анализа, т.к. недостаточное количество биоматериала приводит к получению ложных результатов;

- с минимальным загрязнением материала нормальной микрофлорой, т.к. ее избыток приводит к ошибочной трактовке полученных результатов.

При сборе проб следят за тем, чтобы в лаборатории при вскрытии емкости с биоматериалом не образовывался аэрозоль: пробы крови и других жидкостей организма аккуратно без образования пены переносят из шприца в сухую и/или наполненную средой (антикоагулянтом) посуду. При отборе проб крови предпочтительно следует использовать вакуумсодержащие системы.

Сопроводительным документом в лабораторию является направление на микробиологическое исследование по форме N 204-у (утверждена приказом МЗ СССР от 04.10.1080 г. N 1030), где указываются: учреждение здравоохранения, дата и время взятия материала (часы), фамилия, имя, отчество и возраст пациента; отделение, в котором он находится; номер медицинской карты стационарного больного или амбулаторной карты, номер участка (для АПУ), адрес места жительства, место работы или учебы; диагноз, дата заболевания, показания к обследованию (в направлении подчеркивается); материал, посылаемый на исследование (в направлении подчеркивается), цель и наименование исследования; антибактериальные (иммунные) препараты, если проба сдается на фоне антибиотико- и/или иммунотерапии; фамилию, имя, отчество лечащего врача (консультанта), направляющего материал на исследование. При направлении биоматериалов, полученных при вскрытии, указывают также отделение, в котором умер больной.

Отбор пробы просветных фекалий. Фекалии тотчас после дефекации собирают из предварительно продезинфицированных, тщательно промытых (особое внимание следует уделять удалению дезинфектантов, оказывающих ингибирующее действие на микрофлору фекалий и существенно искажающих результаты исследования), ополоснутых заварным кипятком и охлажденных до комнатной температуры судна или горшка сразу после дефекации в стерильный одноразовый контейнер при помощи вмонтированного в его крышку стерильного шпателя-ложечки. В экстремальных ситуациях (реанимационные больные, маленькие дети) материал собирают в такой же контейнер с ложечкой или ректальным тампоном; возможен также сбор материала со стерильной сухой пеленки, не касаясь ткани.

Пробы можно также собирать с помощью специальных стерильных палочек или проволочной петли, приготовленных из нержавеющего металла (алюминий, сталь, титан).

При наличии в испражнениях патологических примесей слизи, крови, хлопьев, гноя они отбираются отдельно от пробы фекалий.

Наиболее подходящей емкостью для сбора фекалий является специальный стерильный одноразовый контейнер с широким горлом и завинчивающейся крышкой, содержащий одноразовую ложечку-шпатель, вмонтированную в крышку контейнера. Если фекалии жидкие, контейнер заполняют не более чем на 1/3 объема для предохранения от разбрызгивания материала при вскрытии емкости в лаборатории. Если фекалии оформленные, плотные — помещают в контейнер 3–4 ложечки (1,5-2,0 г). Материал, собранный с несвежего постельного белья, искажает результат, а заполненный до верха контейнер не подлежит исследованию.

В случае отсутствия в лаборатории одноразовой посуды порцию фекалий помещают в специально смонтированную стерильную стеклянную посуду, разрешенную к использованию в установленном порядке.

Отбор проб пристеночных фекалий. В случае невозможности получения испражнений после дефекации, материал берут непосредственно из прямой кишки с помощью “зонд тампона”, вводя его в кишку на 8–10 см, осторожно вращая тампон вокруг оси, собирают материал с крипт ануса и так же осторожно извлекают тампон.

Тампон помещают в стерильную пробирку однократного применения или в транспортировочную емкость с агаризованной средой без угля или в стерильную стеклянную пробирку, или в стерильную пробирку с забуференным физиологическим раствором с глицерином либо с пептонной водой.

При профилактических обследованиях здоровых лиц на сальмонеллоносительство накануне взятия испражнений для исследования допустимо применение солевого слабительного (25–30 г магнезии сульфата-MgSO4), растворенного в теплой воде.

Не принимается для исследования на сальмонеллоносительство материал, взятый на дому в отсутствии медицинского работника.

Кровь для исследования берут в начале заболевания, а также повторно в период лихорадки или в разгар рецидивов стерильным шприцем из локтевой вены в объеме 2–10 мл (в зависимости от возраста пациента), в более поздние сроки или при слабовыраженной клинической картине — 15–20мл. Взятую кровь высевают у постели больного непосредственно во флаконы с питательной средой для культивирования сальмонелл.

У детей до одного года кровь берут в доступных количествах из пальца, пятки или мочки уха.

Рвотные массы и промывные воды желудка отбирают при заболевании, сопровождающемся соответствующей симптоматикой, в объеме до 100мл. Для исследования используют первые порции промывных вод, полученные без применения бактерицидных средств.

В случае кислой реакции (рН < 4,5) рвотных масс их перед посевом нейтрализуют 10%-ным раствором бикарбоната натрия, промывные воды центрифугируют 15 минут при 3000 об./мин. и исследуют осадок. В случае невозможности центрифугирования допускается высев нативного материала.

Желчь (дуоденальное содержимое) собирают в стерильные пробирки. При этом отдельно собирают дуоденальное содержимое, пузырную желчь и желчь из желчных протоков (порции А, В и С соответственно).

Кислая реакция, белесоватый оттенок, наличие хлопьев свидетельствуют о примеси желудочного сока и делают материал непригодным для бактериологического исследования.

Спинномозговая жидкость подлежит исследованию при наличии менингеального или менингоэнцефалитического синдромов.

Пробу (3–5 мл) помещают в стерильную пробирку и доставляют в лабораторию, предохраняя материал от замораживания (можно использовать термос).

Мочу для исследования собирают после тщательного туалета наружных половых органов. Первую порцию мочи отбраковывают (не берут для анализа), остальную (в количестве 20–30 мл) собирают в стерильную посуду и доставляют в лабораторию. Мочу центрифугируют 15 минут при 3000об./мин. и для исследования используют осадок. Допускается высев нативного материала.

Операционный и секционный материал для исследования отбирают в случае необходимости при оперативных вмешательствах или на месте вскрытия. Масса пробы должна составлять не менее 20 г.

Микробиологические лаборатории (отделения) учреждений здравоохранения, не имеющие инфекционных отделений, производят бактериологическую диагностику сальмонеллеза с идентификацией выделенных культур до рода Sallmonell.

Далее для определения видовой и групповой принадлежности (серотипирование) направляются в микробиологическую лабораторию ФГУЗ “Центр гигиены и эпидемиологии в городе Москве” или микробиологические лаборатории отделов ФГУЗ “Центр гигиены и эпидемиологии в административном округе” при обязательном выполнении следующих требований:

- выделенные культуры сальмонелл направляются в микробиологическую лабораторию в двух вариантах: на “простом косячке” и “голодном агаре”;

- для передачи культуры сальмонелл оформляются следующие документы:

журнал передачи культур (с обязательными графами — Ф.И.О. и подпись работника лаборатории, принявшего культуру, и дата передачи);

бланк “Направление выделенных культур сальмонелл из внутрибольничных очагов и в случае “заносов” с указанием наименования больницы, отделения и номера палаты; Ф.И.О. пациента, от которого выделены культуры, возраст, диагноз, адрес местожительства; название культуры (желательно с идентификацией вида);

паспорт штамма: номер культуры, название культуры, культуральные, биохимические свойства штамма. Данные серологических исследований.

Обязательно указывается Ф.И.О., направившего культуру. Дата (число, месяц, год), подпись ответственного лица.

Этиологическая расшифровка случаев сальмонеллеза проводится не позднее 4–5-го дня с момента взятия пробы.

Микробиологические (бактериологические) лаборатории (отделения) учреждений здравоохранения, имеющие инфекционные отделения, а также микробиологические (бактериологические) лаборатории (отделения) инфекционных больниц производят бактериологическую диагностику сальмонеллеза с идентификацией выделенных культур до вида посредством серотипирования.

Для установления этиологии сальмонеллеза с тяжелым и (или) атипичным клиническим течением, при расследовании эпидемических вспышек сальмонеллеза, в том числе внутрибольничных, или в случаях “заносов” сальмонеллеза в больницы, а также в целях мониторирования внутрибольничной инфекции, выявления источников инфекции, путей и факторов передачи, культуры сальмонелл направляются для типирования с помощью молекулярно-биологических методик (пульсэлектрофореза, ПЦР-типирования, мультилокусного секвенирования и прочее) в микробиологическую лабораторию Референс-центра по мониторингу за сальмонеллезами (ФГУН Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора, Новогиреевская, д. 3а, тел. 672-11-32).

Примечание:

Референс-центр по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней (вирусные гепатиты, внутрибольничные инфекции, сальмонеллезы, ОКИ, ВИЧ и ВИЧ ассоциированные инфекции, инфекции верхних и нижних дыхательных путей, ИПП) с функциями и в рамках ММСП (2005) (бактериальный менингит) создана в соответствии с приказом Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 17 марта 2008 г. N 88 “О мерах по совершенствованию мониторинга за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней” (приложение 3) создан на базе ФГУН Центральный НИИ эпидемиологии Роспотребнадзора (адрес: Москва, ул. Новогиреевская, д. 3а, тел. 672-11-32).

Микробиологическая лаборатория ФГУЗ “Центр гигиены и эпидемиологии в городе Москве” расположена по адресу: Москва, Графский переулок, дом 4/9, тел. 687-40-64.

Начальник Управления организации медицинской помощи

А.В.ПОГОНИН

Начальник Управления организации медицинской помощи детям и матерям

В.А.ПРОШИН